HPLC를 사용하려다가 문제가 발생했다. bubble?

탈기 장치에 문제 발생

안녕하세요. 시기입니다:)

오랜만에 HPLC를 담당하게 되어서 분석장비에 대한 메인턴스를 진행해봤습니다.

이동상을 만들고 펌프를 가동했지만, 탈기 장치에서 무한 에어가 나오기 시작했네요.

이 부분에서 에어가 안 잡히면 분석에도 장애가 있을 수 있으므로 꼭 잡고 가야 하는 부분입니다.

탈기 장치가 제대로 작동 안 하면 RT나 BASE에도 영향을 충분히 줄 수 있습니다. 

 

탈기 장치란?

HPLC에서 탈치장 치는 목적은 이동상 중에 있는 용존산소 및 질소, 에어 등을 제거하는 장치라고 보시면 됩니다.

여러 가지 종류가 있지만, 3가지로 분류해보면 다음과 같습니다.

• 진공 탈기(Vacuum Degassing) 
      진공상태에서 여과시킴으로써 여과와 degassing을 동시에 수행할 수 있어서 가장 일반적으로 많이 사용할 꺼라 예상합니다. 대부분은 HPLC는 진공 
• Helium주입(Helium Sparging)
      Helium을 용매에 주입함으로써 air, oxygen, bubble을 제거시키는 방법으로 헬륨의 가격이 많이 상승한 지금에는 사용하기에는 부담스러울 수 있습니다.
• 초음파 처리(Ultra sonication)
      이동상 용매에 용존 되어있는 O2 , Air , Bubble 등을 초음파를 가하여 제거시키는 방법입니다. 효과도 좋은 편입니다.

주의사항은?

이동상을 제작하는 과정에서 미리 버플을 방지하게는 좋습니다.

• 이동상을 담는 용기는 잘 세척된 것으로 사용하여야 한다.
• Solvent reservoir filter를 반드시 부착하여 사용하여야 한다.  (필수)
• Filter를 오래 사용하거나 buffer와 유기용매를 번갈아 여러 번 사용할 때는 filter가 막혀 bubble 등이 생길 우려가 있다.
• Filter는 오래 사용한다면 물 or MeOH가 담긴 비커에 넣어 Sonicator를 10분 정도 세척을 하고 다시 물로 세척을 하여 사용한다.(2회 정도 세척)
• Solvent reservoir filter는 항시 용액에 담가 놓아서 filter내에 공기가 차지 않도록 한다.

그래서 해결방법은?

분석 장비인 탈기 장치에서 문제가 있을 수도 있어서 엔지니어 방문 후에 검토를 하였지만, 문제는 없었습니다.

이동상이 이동하는 첫 번째 필터인 Suction Filter에서 문제가 발생되었던 것입니다.

Suction Filter에서 문제가 있으니 이동상을 잘 만들고 탈기 장치를 잘 관리해도 버블이 생겼던 것입니다.

Suction Filter초음파 세척 후에 사용한 결과 문제가 해결되었습니다.

 

가끔 해결이 안 되는 경우도 있습니다. 이런 경우에는 Suction Filter를 교체하시는 게 좋습니다.

그리고 이동상에는 꼭 Suction Filter를 사용하세요.