HPLC 검출기(Detector)를 알아보겠습니다.

검출기(Detector)

안녕하세요 시기입니다:) 검출기(Detector)를 선택할 때 어떠한 사용 조건이 있을까요?

• signal to noise ratio 가 높을 것(S/N Ratio) 신호 대 잡음비가 좋아야 검출력이 우수하다.
• 검출한계가 (Detection limit)가 낮아야 농도가 낮은 분석 물질의 분석에 유리하다.
• Flow rate, Temperature, Pressure가 안정적으로 분석 결과에 영향을 주면 안 된다.
• 사용 목적에 따라 선택성이 있는 검출기의 경우 다양한 분석이 가능하다.
• 종류 : UV/VIS 검출기, 형광 검출기, 굴절율 검출기, 전기화학 검출기, 전도율 검출기

자외선 /가시선 검출기(UV/VIS Detector)는 가장 많이 사용하는 검출기

• HPLC 검출기중 가장 널리 사용되는 것으로 화합물 등의 결합을 갖는 물질의 UV/VIS 영역의 빛에 대한 흡광도를 측정하여 Beer의 법칙에 따라 혼합 성분의 각 농도를 측정하는 장치
• 광원에서 특정 파장의 빛이 장치를 거쳐 셀 내의 시료에 투사되면 일부는 흡수되고 일부는 시료를 통과하게 된다.
• 특정한 시료는 특정 파장이 빛에 대한 흡광도가 높아서 시료를 투과하는 빛의 강도는 상대적으로 작아짐.
• 흡수되는 빛의 양으로 각 성분의 농도를 측정
• 흡광도 빛이 지나가는 시료층의 두께에 비례함을 Lambert가 발견
• beer는 흡광도가 빛이 지나가는 시료의 농도(c)에 비례함을 발견
• Lambert-Beer law 공식

자외선 /가시선 검출기(UV/VIS Detector) 종류는?

• PDA(Photo Diode Array) : 190~800nm의 전 파장을 동시에 scan 할 수 있다. 또한 Purity값이 더 정확하다.
• Fixed Type : 광원(Lamp)에 따라 정해진 몇 개의 파장만을 사용할 수 있다.
• Variable Type : 190~600nm 사이의 모든 파장 중에서 원하는 파장을 지정하여 사용한다.
• 많은 용질들이 자외선을 흡수하고, 검출기의 감도가 상당히 높기 때문에  HPLC 검출기로 가장 많이 사용한다.
• 사용이 간편하고, baseline 안정화 시간이 짧고 파장 선택 조절이 가능
• 흡수가 없는 용매를 사용한 gradient elution에 적합.

 

분석을 오래 하면서 검출기의 역할은 정말 중요하다고 생각합니다.

검출기의 값이 정상인지는 여러 가지로 확인이 가능하지만, 표준물질로 검량선을 작성하여 관리하는 방법도 좋을 것 같습니다. 이런 경우에는 변하지 않는 표준물질로 하면 되지만, 장비에서 문제가 있을 경우는 또 이러한 물질의 변화도 쉽게 판단할 수 없기는 합니다. 검출기의 검출력은 항상 파악하고 분석해야 될 것 같습니다.